酱香酒酿造怎样进行菌种保藏?
酱香酒酿造怎样进行菌种保藏?
保藏纯种微生物,首先要使保存的微生物不死,然后尽可能地保持菌种的优良性能不变,也就是不使菌种衰退变异。总之,菌种保藏的目的是使菌种不死、不变、不污染。不论哪一种保藏方法,最基本的原理不外乎让微生物处在代谢活动不活泼的休眠状态。保持休眠状态的孢子和芽孢,比保存菌体更有利。从保藏条件来讲,主要是保证低温、干燥和缺氧,迫使微生物休眠。根据保藏规模的大小及微生物类型的差别,可选择不同的方法。
1.琼脂斜面法
若保藏的菌株需要经常移植,或在短时间内要使用,使用琼脂斜面法最为方便。具体做法如下。
(1)室温保藏将琼脂斜面试管菌株放在室温下,一般为15~22℃。这种方法容易引起微生物缓慢生长而衰老,因此室温保藏的菌种需要经常移接,但移接的次数越多,发生变异的可能性也越大。在室温下保藏霉菌,试管棉塞用熔化的石蜡封固,一般要3~4个月移接1次。保藏酵母菌用10~12°Bx的麦芽汁或米曲汁琼脂,培养2~3天的菌株试管,棉塞用石蜡熔封,每2个月移接1次。有的细菌比较娇嫩,则需每月移接1次。
(2)冰箱保藏将已生长好的琼脂试管菌株,放置在4℃冰箱中保藏。霉菌5~6个月移植1次,毛霉科菌易死,1~2个月移植1次;酵母菌3个月移植1次;无芽孢细菌每月移植1次;某些娇弱的菌种,则要几周移植1次。
2.低温保藏
普通4℃冰箱保藏也属于低温保藏。在这个温度下,可以保藏试管琼脂菌种、砂土管和冻干安部等。
(1)低温保藏通常在-20℃保藏真菌是成功的。但在0~-30℃范围内,可能出现水与电解质共晶混合物,这就有可能损.害菌体的存活性。
(2)超低温保藏把菌种放在有液态氮的超低温冰箱中,超低温至-150~-196℃,可能可以保存各类微生物,这是近年来国际上发展的一项新技术。理论上认为,在液态氮的低温下,菌种不会发生遗传变异,而又能保持存活,但还有待于进一步验证。